Набор для выявления и дифференциации антител к S и R формам возбудителей бруцеллеза иммуноферментным методом

Нұсқаулық және қолданылуы

Иммуноферменттік диагностикалық тесттерге (ИФА) жатады. Жұмыс принципі үлгідегі антиденелердің иммобилизацияланған Brucella антигендерімен спецификалық байланысуына, содан кейін ферменттік белгінің қосылуына және боялуын тіркеуге негізделген. Тегіс (S) және дөрекі (R) формалардың антигендерін бөлек енгізу иммундық жауап түрлерін ажыратуға және оларды эпизоотиялық жағдай мен вакцинация деректерін ескере отырып түсіндіруге мүмкіндік береді.

Мұндай жинақтар серомониторингке, мал басын скринингтен өткізуге, бастапқы тесттерден кейінгі растаушы зерттеулерге, сондай-ақ өндірушінің нұсқаулығы бойынша кешенді зертханалық тексеріс құрамында S- және R-жауаптарды ажыратуға қолданылады. Нәтижелер ең сенімді бағалау үшін әрқашан клиникалық бақылаулармен, есеп деректерімен және өзге әдістердің нәтижелерімен (агглютинациялық тесттер, комплементті байланыстыру реакциялары, ПЦР) салыстырылады.

Процедураны қатаң сақтау шешуші маңызды: жарамды үлгі түрлерін пайдалану, айқын гемолиз бен ластануды болдырмау; калибрленген дозаторлармен жұмыс істеу; температура мен инкубация уақытын дәл сақтау; бейспецификалық фонды азайту үшін ұяшықтарды мұқият жуу. Әрбір қоюға оң және теріс бақылаулар мен калибраторлар қосылады; шектік мәнге жақын нәтижелер нұсқаулыққа сай қайта тексеріледі. Сарысу үлгілері әлеуетті жұқпалы ретінде қарастырылады: жеке қорғаныс құралдары, аэрозоль түзілуін болдырмау және дұрыс кәдеге жарату қажет.

ИФА компоненттерінің тұрақтылығы деректің шынайылығы үшін өте маңызды: ферменттік конъюгаттар мен иммобилизацияланған антигендер қызып кетуге және көп мәрте қатыру–жібіту циклдарына сезімтал; ашылған құтылар жарамдылық мерзімінің ішінде пайдаланылады. Ұқсас жинақтарды таңдау кезінде антигендік құрамына (S және/немесе R), нысаналы түрлерде валидациялануына, бақылау материалдарының болуына және мәлімделген сезімталдық пен ерекшелік көрсеткіштеріне назар аударылады.