Ingene Bruce-Ladder V-набор ПЦР для выявления и дифференциации бактерий рода Brucella в биологических образцах

Нұсқаулық және қолданылуы

Әдіс полимеразалық тізбекті реакцияға негізделген: үлгіден ДНҚ бөліп алады, Brucella геномының спецификалық учаскелерін амплификациялайды, ал алынған фрагменттер профилі қоздырғышты ғана анықтауға емес, туыс өкілдерін де ажыратуға мүмкіндік береді. Мұндай тәсіл биоматериалдармен жұмыс істегенде, қоздырғыш аз мөлшерде болатын немесе нашар өсірілетін жағдайларда, жоғары аналитикалық сезімталдық пен арнайы ерекшелігі үшін бағаланады.

Ветеринариялық зертханаларда Brucella-ның биологиялық үлгілерде бар-жоғын растау үшін, сондай-ақ эпизоотиялық қадағалау және шаруашылықтардың эпизоотиялық қолайлылығын мониторингтеу міндеттеріне пайдаланылады. Өндірушінің нұсқаулығына сәйкес, нәтижелер клиникалық қарап-тексеру деректерімен және өзге әдістермен (бактериологиялық, серологиялық) бірге интерпретацияланады, бұл табындағы немесе шаруашылықтағы жағдайды барынша толық көруге мүмкіндік береді.

Іс жүзінде үлгіні дайындаудың тазалығын қатаң сақтау, ДНҚ экстракциясы, реакция қою және өнімдерді талдау үшін бөлек аймақтар ұйымдастыру, калибрленген жабдық пен бақылауларды (оң, теріс, қажет болса — ішкі) қолдану маңызды. Ластануды болдырмау және үлгілердегі ПТР-дың тежегіштерін ескеру аса қажет. Brucella болуы ықтимал бастапқы материалмен жұмыс биоқауіпсіздік ережелерін сақтай отырып жүргізіледі; ПТР үшін, протоколға сәйкес, инактивтелген материалдан өңдеу және экстракциялау жүргізіледі.

Реагенттер температуралық режимнің бұзылуына сезімтал, сондықтан салқын тізбекті ұстау, мұздату–еріту циклдарын минимумға жеткізу және аликвоталар дайындау қажет. Нәтиженің сапасына үлгіні іріктеп алу, сақтау және тасымалдау шарттары әсер етеді: материал дұрыс таңбаланған, жедел жеткізілген және зертхананың стандартты рәсімі бойынша өңделген болуы тиіс.

Баламалы шешімдерді таңдағанда, жинақ тек анықтауды ма, әлде ажыратуды да қамтамасыз ете ме, қай платформада жұмыс істейтіні (дәстүрлі немесе real-time ПТР), қандай үлгі түрлері растаудан өткен, сондай-ақ егжей-тегжейлі протоколдар мен бақылау материалдарының бар-жоғы ескеріледі. Өндірушінің нұсқаулығы және зертхананың ішкі СОП-тары басшылыққа алынады.